馬鈴薯病毒檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)過程

　　馬鈴薯病毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作

　　實(shí)驗(yàn)前將抗體包被在微孔板上

　　根據(jù)抗體標(biāo)簽上標(biāo)識(shí)的稀釋倍數(shù)，用1倍的包被緩沖液稀釋抗體。混合均勻

　　請(qǐng)根據(jù)使用量來確定抗體稀釋液體積

　　注意：1個(gè)反應(yīng)孔需要100ul的抗體稀釋液。1ml的抗體稀釋液足夠8個(gè)反應(yīng)孔使用，10ml的抗體稀釋液夠96個(gè)反應(yīng)孔使用。

　　在聚乙烯材質(zhì)的容器中制備抗體溶液。（避免抗體黏附的容器上）?？贵w溶液準(zhǔn)備好后需立即包被，否則抗體可能會(huì)部分失效。

　　抗體稀釋液不能存放，配制好后請(qǐng)立即使用。

　　包被抗體

　　在每個(gè)反應(yīng)孔中加入100ul抗體稀釋液

　　孵育

　　在恒濕箱中，室溫下（25℃）孵育4小時(shí)或在4℃條件下過夜

　　洗板

　　孵育結(jié)束后，將反應(yīng)孔中的試劑倒出

　　加入250ul的1倍PBST緩沖液，之后快速倒出，重復(fù)4-8次

　　將微孔板倒扣在吸水紙上以控干孔中殘留液體

　　馬鈴薯病毒檢測(cè)樣品的提取及稀釋

　　樣品的提取

　　盡可能選擇出現(xiàn)癥狀的植物組織作為樣品，通常將葉片作為ELISA實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)樣品，其它植物組織也可用于ELISA實(shí)驗(yàn)

　　在1個(gè)反應(yīng)孔中加入多片葉片的提取液會(huì)使實(shí)驗(yàn)更經(jīng)濟(jì)一些，但卻降低了實(shí)驗(yàn)的靈敏度。如對(duì)樣品提取有任何疑義請(qǐng)與本公司聯(lián)系

　　若用研缽提取樣品，在每份樣品提取后請(qǐng)*清洗研缽，以免造成樣品間的相互污染

　　絕大多數(shù)樣品，可使用通用樣品提取緩沖液。但有些植物（葡萄、藍(lán)莓等）必須使用特殊的提取緩沖液。如對(duì)樣品提取緩沖液有任何疑義請(qǐng)與本公司聯(lián)系

　　樣品的稀釋

　　樣品研磨后，將樣品提取液與提取緩沖液以1：10（樣品提取液體積：提取緩沖液體積）的比例混合均勻?；蛞?：10（樣品質(zhì)量：提取緩沖液體積）的比例在提取緩沖液中研磨樣品

　　每個(gè)反應(yīng)孔需要100ul的樣品提取稀釋液。多準(zhǔn)備一些樣品提取稀釋液以利于吸取

　　以上便是今天關(guān)于馬鈴薯病毒檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作及樣品的提取和稀釋的全部分享了，希望對(duì)大家今后使用本設(shè)備能有幫助。